【摘 要】
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经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶柱层析和羟基磷灰石柱层析从Ｒａｊｉ细胞中纯化ＡＤＡ达电泳纯。酶纯化３３６倍，比活力达３５５１５Ｕ／ｍｇ蛋白，回收率为２２８３％；经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶过滤法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得ＡＤＡ的分子量分别为３７０ＫＤ和４２８ＫＤ；以
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经硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶柱层析和羟基磷灰石柱层析从Ｒａｊｉ细胞中纯化ＡＤＡ达电泳纯。酶纯化３３６倍，比活力达３５５１５Ｕ／ｍｇ蛋白，回收率为２２８３％；经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶过滤法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得ＡＤＡ的分子量分别为３７０ＫＤ和４２８ＫＤ；以腺苷或脱氧腺苷为底物测得Ｋｍ值分别为１６６６７μｍｏｌ／Ｌ和１０１９５μｍｏｌ／Ｌ．
Purification of ADA from Raji cells by ammonium sulfate fractionation, DEAE-cellulose ion exchange chromatography, Sephadex G-200 gel column chromatography and hydroxyapatite column chromatography gave electrophoretic purity. The enzyme activity was up to 336 times, and the specific activity was 35515U / mg. The recovery rate was 2283%. The molecular weight of ADA was 370KD and 428KD respectively by gel filtration and SDS-PAGE. The Km values of adenosine or deoxyadenosine were 16667μmol / L and 10195μmol / L, respectively.
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