【摘 要】
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目的探讨miR-221/222增加恶性胶质瘤放射抗性的机制。方法实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测U251、U87及LN229系胶质瘤细胞在接受照射后3和6 h miR-221/222的表达水平；通过平板克隆形成实验，观察敲低U251、U87及LN229系胶质瘤细胞miR-221/222后肿瘤细胞放射敏感性的变化；染色质免疫沉淀技术(ChIP)检测c-jun与miR-221/
【机 构】
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300070 天津医科大学研究生院,300070 天津医科大学研究生院,300070 天津医科大学研究生院(现在天津市环湖医院放疗科),天津市环湖医院放疗科
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目的探讨miR-221/222增加恶性胶质瘤放射抗性的机制。
方法实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测U251、U87及LN229系胶质瘤细胞在接受照射后3和6 h miR-221/222的表达水平；通过平板克隆形成实验，观察敲低U251、U87及LN229系胶质瘤细胞miR-221/222后肿瘤细胞放射敏感性的变化；染色质免疫沉淀技术(ChIP)检测c-jun与miR-221/222的结合情况；虫荧光素酶活性报告试验验证PTEN是miR-221/222的靶基因；使用Western blot检测敲低胶质瘤细胞miR-221/222后的相关蛋白的表达；通过胶质瘤裸鼠模型，观察敲低miR-221/222后放射治疗的效果。
结果U251、U87及LN229系胶质瘤细胞在接受照射后miR-221/222的表达上调(t＝5.48～29.21，P<0.05)；敲低胶质瘤细胞miR-221/222后，其放射敏感性提高(F＝1 202.22，1 789.12，1 012.32，P<0.05); c-jun转录调控miR-221/222的表达；PTEN是miR-221/222的靶基因(t＝13.16，P<0.05)；Western blot检测显示，敲低胶质瘤细胞miR-221/222后，pAkt及DNA-PKcs的表达下调，PTEN和GSK-3β的表达上调，Akt表达保持稳定；体内实验结果显示，敲低miR-221/222的表达联合放射治疗可显著抑制胶质瘤的生长(F＝56.36，P<0.05)。
结论放射可诱导胶质瘤细胞miR-221/222的表达上调，miR-221/222通过激活Akt通路增加恶性胶质瘤的放射抗性。
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