基于酶促反应动力学的无标准品ELISA抗体滴度定量方法

• 作 者: 方成 陈卓 刘立 梅志强
• 机 构: 武汉轻工大学医学院移植工程实验室,武汉轻工大学生物与制药工程学院
• 出 处: 重庆医学
• 发表日期: 2015年12期
• 关键词: 酶促反应动力学 酶联免疫吸附测定 抗体滴度 kinetics of enzyme-catalyzed reactions enzyme-linked immun
• 基金项目: 湖北省教育厅科研计划资助项目（Q20121808）.

目的建立无标准品的酶联免疫吸附测定（ELIsA）抗体滴度定量方法。方法对血清抗体ELISA检测设置非特异、阴性对照、特异和总抗体检测组。显色早期的时间一吸光度数据经线性拟合的斜率即吸光度变化速度，分别记为№、v0、vs、vt。基于底物过量时v值与待测抗体浓度（C）呈直线关系，设计v值函数计算待测样本与阴性对照样本的抗体浓度倍比。以鱼胶原蛋白免疫昆明小鼠的血清特异IgG抗体检测进行实例分析。结果函数C／Cc=（v-v0）／（vc-v0）可计算待测样本与阴性对照样本的特异抗体浓度倍比（滴度）。结论该动力学EL