重组表达人载脂蛋白（a）羧基末端kringle结构域抑制新生血管

• 作 者: 申乐 陈保生 薛红
• 机 构: 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院麻醉科,中国医学科学院基础医学研究所,北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系
• 出 处: 基础医学与临床
• 发表日期: 2013年6期
• 关键词: 载脂蛋白 kringle结构域 毕赤酵母 新生血管 apolipoprotein kringle Pichia pastoris angiogenesis
• 基金项目: 国家重点基础研究发展计划（973计划）（G2000056902）,国家自然科学基金（30100068）

目的利用毕赤酵母重组表达人载脂蛋白（a）[Apo（a）]羧基末端kringle结构域，明确其抑制新生血管和肿瘤细胞增殖的能力。方法分别构建重组表达Apo（a）羧基末端kringle V结构域（RHAKA）与kringle 1V10型-krin--eV结构域（RHAKB）的pPICZotA质粒；转染毕赤酵母x-33分泌表达RHAKA与RHAKB，RHAKs利用His·Tag亲和层析纯化，以及反相高效液相色谱与氨基酸残基测序鉴定；明确RHAKs的糖基化及二硫键形成情况后，利用细胞增殖实验与鸡胚绒毛尿