【摘 要】
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目的:克隆并体外表达HPV58E6,为E6致癌作用和疫苗的研究奠定基础.方法:通过PCR方法从HPV58全基因克隆中扩增出HPV58E6基因片段,利用基因重组技术,将其克隆至真核表达质粒pcDN
【机 构】
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山东大学医学院微生物学教研室,山东大学医学院分子生物学实验室
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目的:克隆并体外表达HPV58E6,为E6致癌作用和疫苗的研究奠定基础.方法:通过PCR方法从HPV58全基因克隆中扩增出HPV58E6基因片段,利用基因重组技术,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3的T7启动子下游,体外转录成mRNA后,在源自网织红细胞的翻译缓冲液中表达生物素标记的HPV58E6蛋白,化学发光法检测,X光胶片曝光显影鉴定.结果:酶切电泳证实质粒构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相当于HPV58E6分子量约18.8kD的位置出现条带,X光胶片亦在相应位置出现印迹条带.结论:成功表达了含有生物素标记的HPV58E6蛋白,为其致癌作用和治疗的研究奠定基础.
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