【摘 要】
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目的 初步探讨心肌细胞缺氧复氧(H/R)时miR-1和热休克蛋白90(HSP90)的关系.方法 建立乳大鼠心肌细胞H/R模型,Western-Blot检测HSP90蛋白表达.生物学信息分析miR-1和HSP90亚型
【机 构】
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广东省人民医院(广东省医学科学院)广东省老年医学研究所老年医学科,广州市,510080;广州市妇女儿童医疗中心儿科研究所,广州市,510623
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目的 初步探讨心肌细胞缺氧复氧(H/R)时miR-1和热休克蛋白90(HSP90)的关系.方法 建立乳大鼠心肌细胞H/R模型,Western-Blot检测HSP90蛋白表达.生物学信息分析miR-1和HSP90亚型的结合情况.重组miR-1慢病毒感染乳大鼠心肌细胞,Western-Blot检测HSP90aa1和HSP90b1蛋白表达,实时荧光定量PCR检测HSP90aa1和HSP90b1的mRNA表达.重组miR-1慢病毒感染乳大鼠心肌细胞后H/R处理,Western-Blot检测HSP90、HSP90aa1、HSP90b1蛋白的表达.结果 心肌细胞H/R后,HSP90蛋白表达水平下降.TargetScan分析显示HSP90蛋白的两个亚型HSP90aa1和HSP90b1的3'-UTR与miR-1结合.与对照组相比,HSP90aa1和HSP90b1蛋白在感染LV-rno-miR-1组表达水平降低,而在感染LV-rno-miR-1 sponge组中表达水平增加.感染LV-rno-miR-1组和LV-rno-miR-1 sponge组较对照组的HSP90aa1和HSP90b1的mRNA表达无明显变化.相对于感染LV-rno-miR-1组和缺氧复氧组,感染LV-mo-miR-1病毒后缺氧4小时复氧12小时,HSP90、HSP90aa1、HSP90b1蛋白表达水平进一步降低.结论 心肌缺氧复氧时,HSP90蛋白及其亚型aa1和b1表达下降.miR-1可能在心肌缺氧复氧中直接或间接调控HSP90.
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