【摘 要】
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为优化僵蚕醇溶蛋白质的提取工艺,并建立相应的SDS－PAGE(十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳)、HPLC(高效液相色谱)、FTIR(傅里叶变换红外光谱)指纹图谱.在单因素试验的基础上,
【机 构】
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江苏大学药学院,江苏镇江212013;亳州学院中药学院,安徽亳州236800
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为优化僵蚕醇溶蛋白质的提取工艺,并建立相应的SDS－PAGE(十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳)、HPLC(高效液相色谱)、FTIR(傅里叶变换红外光谱)指纹图谱.在单因素试验的基础上,利用响应面法,以提取率为响应值建立数学模型,获得最佳工艺,用SDS－PAGE、HPLC、FTIR建立僵蚕醇溶蛋白质指纹图谱.通过单因素试验考察乙醇浓度、料液比、温度、提取时间对僵蚕醇溶蛋白质提取率的影响,迸而用Box－Behnken法设计4因素3水平试验,迸行响应面回归分析.结果表明,僵蚕醇溶蛋白质的最佳提取工艺条件为料液比1g ∶24.22mL,乙醇浓度38. 73%,温度35℃,提取时间3.94h,此时的提取率为0.5402%.用SDS－PAGE、HPLC、FTIR法建立僵蚕醇溶蛋白质指纹图谱,SDS－PAGE分析结果表明,僵蚕醇溶蛋白质分子量集中在16.7～36.2ku;HPLC分析结果表明,主要僵蚕醇溶蛋白质的保留时间为2.048min与3.354min,其含量分别占总蛋白量的31.23%与32.93%;FTIR分析结果表明,僵蚕醇溶蛋白质在2927.71、1631.71、1457.24、1310.71cm－1处有主要吸收峰.研究并建立了僵蚕醇溶蛋白质的优化提取条件,并获得了蛋白质的SDS－PAGE、HPLC、FTIR指纹图谱.
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