FL转基因细胞的构建及膜型FL对U937细胞的体外促增殖效应

• 作 者: 居颂光 居颂文 傅晋翔 仇红霞 王明元 周斌 王凤鸣 刘彤
• 机 构: 215000
• 出 处: 中国现代医药杂志
• 发表日期: 2005年5期
• 关键词: FL 转基因细胞 白血病 细胞株 U937细胞 转基因细胞 促增殖效应 FL细胞 体外刺激 膜型 逆转录病毒表达载体 白血病细胞株 L929细胞 FL Tran
• 基金项目: 江苏省重点实验室基金，国家自然科学基金

目的构建稳定表达人膜型FL分子的转基因细胞株,观察膜型FL和可溶性FL对单核细胞性(M5型)白血病细胞株的体外促增殖效应.方法利用PCR方法克隆人FL全长基因,继而重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term,转染包装细胞293T,用含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的转基因细胞.采用RT-PCR和流式细胞仪表型分析等方法进行鉴定.MTT法分析了L929/FL细胞和可溶性FL体外刺激U937细胞的增殖效应.结果成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞L