渗压震扰法释放Aeromonas sp．2016菌株外周间质中几丁质酶的研究

• 作 者: 文红秀 李昌平
• 机 构: 西南农业大学动物科技学院,重庆永川朱沱镇畜牧兽医站
• 出 处: 中国生物工程杂志
• 发表日期: 2005年6期
• 关键词: 气单胞菌 Aeromonassp.2016菌株 几丁质酶 渗压震扰法 外周胞质 蛋白质 纯化方法 Osmotic shock Periplasm Chitina

气单胞菌Aeromonas sp.2016菌株能产生多种几丁质酶,其中的胞外酶C可能聚集于细胞外周胞质.为了避免破碎菌体而产生过多的杂蛋白,探索了用渗压震扰法(osmotic shock)来释放这部分酶.主要步骤是:先将菌体悬浮在20%蔗糖-0.03mol/L Tris-HCl(pH8.0)高渗透压的溶液中,再快速转移到纯水低渗透压溶液中,产生瞬间渗压震荡,释放细胞外周胞质中的酶.结果表明,通过渗压震扰法释放出的酶纯度最高,比活力达到142.79U/g,比培养液上清液的54.46U/g和菌体破碎样品的14