HPV16^＋治疗性无佐剂蛋白疫苗——HPV16z-Hsp65-E6／E7的构建、表达及纯化工艺研究

• 作 者: 王小兵 李茉 刘毅 田海梅 刘朝阳 李艳芬 曹冬艳 梁智 程
• 机 构: 中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所生物检测中心
• 出 处: 中国生物工程杂志
• 发表日期: 2006年12期
• 关键词: 人乳头瘤病毒16型 治疗性疫苗 宫颈癌 HPV16 Therapeutic vaccine Cervical cancer

目的：研制针对我国宫颈癌高危相关的HPV16型的治疗性无佐剂蛋白疫苗。方法：应用PCR技术自我国山西宫颈癌高发现场分离到的毒株——HPV16z中获得E6／E7转化基因片段，自卡介苗菌株中克隆获得Hsp65基因片段，对E6／E7基因片段定点突变修饰，构建pET28a-Hsp65-E6／E7表达载体，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达融合蛋白，并研究重组蛋白的纯化方案和工艺。结果：成功构建pET28a-Hsp65-E6／E7重组表达载体，E6／E7突变位点正确，融合蛋白在亲和层析柱上正确复性和初步纯化，经阴离