乙型肝炎病毒e抗原前体蛋白在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化及其特性的初步研究

• 作 者: 周福元 隋礼丽 骆抗先 侯金林
• 机 构: 广州南方医院感染内科,广州,510515
• 出 处: 中华医学杂志(英文版)
• 发表日期: 2002年5期
• 关键词: HBeAg前体蛋白 乙型肝炎病毒 pQE30

目的研究仅存在宿主细胞内的HBeAg前体蛋白(25 kD)在乙型肝炎发病机制中的作用和QIAGEN表达和纯化系统在HBV研究中的价值.方法 HBV前C/C基因被克隆到表达载体pQE30中,HBeAg前体蛋白(25 kD)在大肠杆菌中表达后纯化 ,经ELISA和western blot检测其是否具有成熟HBeAg(17 kD)的抗原性.结果表达载体中的克隆片段经测序后证实为ayw亚型.在T5启动子的调节下可表达25 kD的可溶性溶合蛋白,合成的HBeAg前体蛋白在与抗HBe反应方面具有与成熟HBeAg(17 kD)相同的抗原性.表达的HBeAg前体蛋白经纯化后纯度可达89.6%.每升诱导后的菌液可得到HBeAg前体蛋白2.4 mg.结论 HBeAg前体蛋白(25 kD)具有与成熟HBeAg相同的反应原性,在乙型肝炎的发病机制中可能起着重要作用.