犬恶丝虫天冬氨酸转氨酶基因的原核表达及分析

• 作 者: 刘梅 兰景超 王宇 林海 张志和 王成东 罗娌 刘理 古小彬
• 机 构: 四川农业大学动物医学院,成都大熊猫繁育研究基地
• 出 处: 中国人兽共患病学报
• 发表日期: 2016年8期
• 关键词: 犬恶丝虫 AspAT基因 克隆 原核表达 免疫荧光定位 Dirofilaria immitis AspAT gene clone prokaryotic exp
• 基金项目: 成都大熊猫繁育研究基金项目（No.CPF2014-09）资助~~

目的了解犬恶丝虫天冬氨酸转氨酶（AspAT）基因特征及其在虫体的定位,对犬恶丝虫AspAT（DiAspAT）基因进行了原核表达和免疫荧光定位分析。方法从犬恶丝虫成虫转录组数据库中筛选到DiAspAT基因序列,通过RT-PCR方法克隆DiAspAT基因,利用相关软件进行生物信息学分析;构建原核表达载体pET32a（＋）-AspAT并进行诱导表达;表达产物经Ni-NTA层析柱纯化后进行Western blotting分析;通过免疫组化技术观察DiAspAT蛋白在犬恶丝虫虫体内的定位分布。结果 DiAspAT基