聚乙交酯丙交酯纳米粒装载氨基酮戊酸光动力疗法对A431细胞的杀伤效应

• 作 者: 石磊 王秀丽 涂庆峰 赵锋 栾瀚森 王浩 王宏伟
• 机 构: 200050上海市皮肤病医院,200050上海市皮肤病医院,200050上海市皮肤病医院,中国医药工业研究总院药物制剂国家工程研究中心,中国医药工业研究总院药物制剂国家工程研究中心,中国医药工业研究总
• 出 处: 中华皮肤科杂志
• 发表日期: 2013年46期
• 关键词: 肿瘤 鳞状细胞 光化学疗法 氨基酮戊酸 纳米粒子

目的 制备装载氨基酮戊酸(ALA)的聚乙交酯丙交酯纳米粒(PLGA NP),增强ALA光动力体外杀伤人皮肤鳞癌A431细胞的效应.方法 改良复乳溶剂挥发法制备ALA PLGA NP,并对其粒径、包封率、载药量和形态进行表征.用透射电镜观察体外培养的A431细胞吸收ALA PLGA NP后的形态；用多功能酶标仪测定24 h内0.1 mmol/L ALA组、1 mmol/L ALA组、ALA PLGA NP组(含0.1 mmol/L ALA)、PLGA NP组生成的原卟啉Ⅸ(PpIX)荧光强度变化以确定最佳孵育时间.将培养A431细胞分为对照组、0.1 mmol/L ALA避光组、1 mmol/L ALA避光组、ALAPLGA NP避光组、PLGA NP避光组、单纯照光组、0.1 mmol/L ALA PDT组、1 mmol/L ALA PDT组、ALA PLGA NP PDT组、PLGA NP PDT组,对照组及各避光组严格避光,PDT组及单纯照光组用He-Ne激光照射,用噻唑蓝法测定其细胞杀伤效应.将A431细胞分为对照组、ALA PDT组、ALAPLGA NP PDT组,对照组避光,PDT组采用He-Ne激光照射,12、24 h后用流式细胞仪分析细胞凋亡情况.结果 ALA PLGA NP呈球形,平均粒径为(65.6±26.0) nm,包封率为(65.8±7.2)％,载药量为(0.62±0.27)％.ALAPLGA NP能被A431细胞吸收并聚集于细胞质中.PpIX荧光动力学检测显示24 h内ALA组、ALA PLGA NP组荧光强度随时间增加而上升.当孵育6h、24 h时,ALA PLGA NP组生成的PpIX荧光强度均高于0.1 mmol/L ALA(均P＜0.01).ALA PLGA NP PDT组对A431细胞的杀伤效应也明显强于0.1 mmol/LALAPDT(6 h:t=35.685,P＜0.01；24 h:t=5.262,P＜0.01).ALA PLGA NP PDT组细胞的凋亡率也高于ALA PDT组(12 h:t=9.074,P＜0.01;24 h:t=9.095,P＜ 0.01).结论 ALA PLGA NP能提高PpIX生成量,增强ALA PDT对A431细胞的体外杀伤效应以及ALA PDT诱导肿瘤细胞凋亡的效应。