人工RNA结合骨架的可溶性表达及其与寡核苷酸链的相互作用分析

• 作 者: 徐如飞 徐奕倩 陈倩倩 蒋培蓉 陈美雯 蒲首丞 孙梅好
• 机 构: 浙江师范大学化学与生命科学学院
• 出 处: 山西农业科学
• 发表日期: 2020年2期
• 关键词: RNA结合蛋白 可溶性表达 寡核苷酸 相互作用 RNA binding proteinsoluble expressionoligonucleotideinte
• 基金项目: 国家级大学生创新创业训练计划项目(201810345014),浙江省自然科学基金项目(LY19C050001)

为了分析ERBS与其目标寡核苷酸的相互作用,研究设计合成了对应目标寡核苷酸的ERBS基因,并进行了蛋白的原核表达、纯化以及其与目标寡核苷酸的相互作用分析。结果发现,ERBS在Escherichia coli BL21(DE3)中表达时呈现包涵体状态,而改变宿主细胞为Escherichia coli Rosetta(DE3),可极大提高其可溶性表达水平;纯化的ERBS与FAM标记的寡核苷酸互作分析发现,其解离常数为(9.76±0.62)nmol/L。试验结果可为深入研究不同ERBS与其目标寡核苷酸