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目的 探讨HBV感染人近端肾小管上皮细胞系HK-2后对其表达Toll样受体4(TLR4)的影响,并观察TLR4抗HBV感染的生物学作用。方法 收集HBVDNA拷贝在107~108/ml的患者血清,通过显微镜及免疫荧光法观察HBV阳性血清感染HK-2前、后细胞形态及α抗平滑肌抗体(α-SMA)的变化,应用MTT法检测不同浓度TLR4刺激因子(LPS)及TLR4抑制因子(CLI-095)对HK-2细胞增殖的影响。选取10μl/ml脂多糖(LPS)及5μg/mlCLI-095作用于HBV感染的HK-2细胞,通过细胞免疫荧光技术及免疫印迹法检测HK-2细胞内TLR4蛋白的变化,ELISA法和荧光定量PCR法观测各组细胞上清液中HBsAg、HBeAg和HBVDNA含量的变化。结果 HBV分别感染HK-2细胞12h和24h后,随感染时间延长,细胞形态变得不规则,数量也减少。α-SMA的表达水平与感染24h后相比,在HBV感染12h后表达最多。LPS浓度在小于10μg/ml范围内,HBV感染HK-2细胞24h后其增殖程度与剂量呈正相关,与CLI-095浓度呈负相关(P<0.05)。LPS组HK-2细胞TLR4蛋白的表达高于CLI-095组,其上清液中HBVDNA水平及HBsAg、HBeAg表达水平较CLI-095组降低。结论 TLR4可能通过免疫炎症反应参与抑制HK-2细胞中的HBV复制,当HBV感染肾组织细胞时可发挥抗病毒作用。