论文部分内容阅读
目的观察miR-19a对慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用,并探讨其潜在机制。方法 75只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组,行假手术;CCI组,坐骨神经结扎法构建CCI大鼠模型;CCI+inhibitor组,CCI大鼠鞘内注射miR-19a inhibitor。于术前当天(0 d)和术后3、7、14、21 d观察机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热刺激反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的变化。采用RT-qPCR检测腰椎脊髓中促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA及JAK2和STAT3表达的变化,Western blot检测SOCS3蛋白水平的表达,荧光素酶报告基因技术验证miR-19a的靶基因。结果与假手术组比较,CCI组大鼠脊髓的miR-19a表达显著上升(P<0.05),MWT显著降低,TWL显著缩短(P<0.05)。与CCI组比较,CCI+inhibitor组MWT显著升高,TWL显著延长(P<0.05)。RT-qPCR检测结果表明,CCI可显著促进促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1βm RNA的表达;而与CCI组比较,CCI+inhibitor组IL-6、TNF-α、IL-1βm RNA表达水平均显著降低(P<0.05)。另一方面,与假手术组比较,CCI组大鼠术后脊髓中JAK2和STAT3 m RNA水平明显增加;与CCI组比较,CCI+inhibitor组术后脊髓中JAK2和STAT3的表达显著降低(P<0.01)。荧光素酶报告基因检测结果表明JAK2/STAT3上游的负调控因子SOCS3是miR-19a的靶基因。Western blot检测结果表明CCI组大鼠脊髓中SOCS3水平较假手术组升高,且SOCS3水平在CCI术后第7天达到最高,而后呈下降趋势;与CCI组比较,CCI+inhibitor组SOCS3表达明显上升(P<0.05)。结论 miR-19a inhibitor能缓解CCI大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏,该作用与SOCS3介导的JAK2/STAT3通路有关。