目的 探讨miR-149在SiO2诱导的肺纤维化中对白细胞介素-6(IL-6)表达水平的调节作用.方法 (1)建立SiO2粉尘诱导的小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR)检测小鼠肺组织miR-149表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫组织化学法观察白细胞介素-6(IL-6)的蛋白表达情况.(2)应用具有肺泡Ⅱ型上皮细胞特性 的(A549)及支气管上皮细胞(HBE)构建SiO2粉尘刺激的呼吸系统上皮细胞模型,应用qRT-PCR检测miR-149水平,用Western blot法检测IL-6蛋白表达情况.(3)通过体外转染miR-149相似剂(mimics)及抑制剂(inhibitors)至A549细胞,Westem blot法检测细胞表达炎症因子IL-6蛋白的表达情况.(4)双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测煤工尘肺患者血清中IL-6蛋白的表达情况.结果 (1)在SiO2诱导的小鼠肺纤维化模型中,与空白对照组比较,SiO2处理后的3个时间点,小鼠肺组织miR-149表达明显下调,而IL-6蛋白表达明显上调,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)在粉尘刺激上皮细胞模型中,A549细胞及HBE细胞经SiO2刺激后,IL-6蛋白表达上调,miR-149表达量明显下调,差异有统计学意义(P＜0.01).(3)对A549细胞转染miR-149相似物及抑制剂后实验结果显示,高表达miR-149后,A549细胞IL-6蛋白表达下调,反之亦然.(4)与对照组比较,Ⅱ期、Ⅲ期煤工尘肺组血清IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 (1)SiO2粉尘所诱导的肺纤维过程中miR-149表达降低,IL-6蛋白表达增高.(2)miR-149可负调控细胞IL-6的表达水平。
二氧化硅诱导的肺纤维化中miR-149对白细胞介素-6的调节
【摘 要】
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目的 探讨miR-149在SiO2诱导的肺纤维化中对白细胞介素-6(IL-6)表达水平的调节作用.方法 (1)建立SiO2粉尘诱导的小鼠肺纤维化模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chainreaction,qRT-PCR)检测小鼠肺组织miR-149表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)和免疫组织化学法观察白细胞介素-6
【机 构】
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210029南京医科大学公共卫生学院职业医学与环境卫生学系,210029南京医科大学公共卫生学院职业医学与环境卫生学系,210029南京医科大学公共卫生学院职业医学与环境卫生学系,210029南京医科
【出 处】
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中华劳动卫生职业病杂志
【发表日期】
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2014年32期
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