【摘 要】
：
目的: 分别构建携带HcRed基因的PET28a(+)原核和PIRES真核载体,并分别在大肠埃希菌和鼠树突状细胞系(DC2.4)中表达、鉴定,为后续基因及蛋白的转染提供基础.方法: 参照基因库
【机 构】
：
江苏大学检验医学研究所免疫研究室,江苏大学附属医院检验科
论文部分内容阅读
目的: 分别构建携带HcRed基因的PET28a(+)原核和PIRES真核载体,并分别在大肠埃希菌和鼠树突状细胞系(DC2.4)中表达、鉴定,为后续基因及蛋白的转染提供基础.方法: 参照基因库中HcRed1基因序列,设计HcRed CDS全长引物,以含有HcRed的质粒为模板,通过PCR获得目的基因,并分别连接于PET28a(+)原核载体和PIRES真核载体.经PCR、酶切鉴定后,原核载体转化大肠埃希菌,经IPTG诱导表达;真核载体用脂质体转染DC2.4,G418筛选出克隆后,应用RT-PCR和流式细胞仪进行检测.结果: 扩增出687 bp的HcRed CDS区序列,构建了原核和真核表达载体PET28a(+)/HcRed和PIRES/HcRed,分别于大肠埃希菌和DC2.4细胞系中成功表达.结论: 成功构建HcRed基因的原核、真核表达载体,并分别在工程菌和细胞系中成功表达,为后续基因及融合蛋白的筛选、示踪和体内观测奠定了基础.
其他文献
物理性能是电热型食具消毒柜的一个重要质量指标,本文对安装3种不同电热元件的食具消毒柜,进行了物理性能试验的比较.试验结果表明,采用光波管和U型光波管的食具消毒柜,具有
[目的]分析IL-1β+3953等位基因与2型糖尿病伴发牙周病的相关关系,为预防糖尿病伴发牙周病的发生和干预性治疗提供理论依据.[方法]用PCR桼FLP方法分别检测对照组、单纯2型糖
目的 探讨腹茧症的临床特点及诊治方法,减少误诊.方法 分析13例腹茧症患者的临床资料.结果 术前9例诊断为肠梗阻,1例诊断为急性阑尾炎,1例诊断为直肠癌,2例诊断为肠扭转.13例
目的 探讨不同剂量阿托伐他汀对老年冠脉严重病变且未进行血运重建患者左心室功能的影响.方法 连续入选40例冠状动脉造影证实血管严重病变但不适于血运重建术或不愿行血运重
我国集中供热事业正在不断发展,供熟面积在逐年增长,运行管理人员也将不断的增加,这无疑将增大供热成本.同时,广大热用户对供热的稳定性及供热质量也提出了更高的要求.如何随
目的 观察重组人p53腺病毒经皮肝动脉灌注治疗肝细胞肝癌的疗效.方法 中、晚期肝癌患者20例,根据造影表现决定灌注药物的靶动脉,每次用药剂量1×10~(12)VP,每周1次,3周为.1个
目的 探讨阿托伐他汀治疗对短暂性脑缺血发作(TLA)患者血脂及血清高敏C反应蛋白(hsCRP)水平的影响.方法 选择91例TLA患者,随机分为TIA常规治疗组(常规治疗组)48例和常规治疗+
目的 构建人巨细胞病毒(HCMV)PP65_(322～561)蛋白片段的原核表达载体PQE30-PP65,并表达蛋白.方法 PCR扩增HCMV PP65第976～1686位核苷酸片段;构建重组表达质粒PQE30-PP65转化M15
工程造价直接反映投资效益的好坏,体现建设项目的工作质量和管理水平.在工程建设中,只有把造价管理作为一项核心工作,才能真正降低工程造价,提高经济效益.文章对加强工程造价
随着计算机和通讯信息技术在医学中的广泛应用,医疗卫生事业进入了崭新的信息时代,各医院已于20世纪90年代实现了医院数字化、信息化管理,而院外急救信息的管理仍停留在传统