过表达DNMT3B7质粒载体的构建及对293A细胞增殖的影响

• 作 者: 张姝 张伟 姜树原 张颜波 吴松泉 黄丽华 孟宪梅 吉训明
• 机 构: 014010内蒙古包头,014010内蒙古包头,包头医学院第二附属医院消化科,泰山医学院附属医院神经内科,丽水学院医学院,首都医科大学宣武医院神经内科首都医科大学宣武医院神经再生教育部重点实验室
• 出 处: 肿瘤防治研究
• 发表日期: 2013年12期
• 关键词: DNA甲基转移酶3B 293A细胞 细胞增殖 P21 DNA methyltransferase3B 293A cell Cell proliferatio
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（81060212,81160244,81360316）,中国博士后基金资助项目（20080430851）,内蒙古自然科学基金资助项目（2010BS1104）,内蒙古自治区高等学校科研项目资助课题（NJZY12221,NJZY12225.NJYT-13-A10）

目的构建DNA甲基转移酶3B（DNMT3B）的一种异构体387的真核质粒表达载体，在体外评价其对人胚肾细胞株293A增殖影响。方法据GenBank中．＆DNMT387cDNA序列设计并合成特异性引物，以RDNMT381为模板，利用高保真Taq酶，进行PCR技术扩增DNMT387，并将扩增产物克隆到真核表达载体pcMv-2B中。将携带DNMT387基因的质粒pcMv_DNMT387及空质粒pcMV-2B转染293A细胞，通过G418筛选出稳定表达的细胞系．MTT法检测细胞的增殖：流式细胞仪检测细胞的细胞周期