【摘 要】
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目的:构建植物双元表达载体pMCP0-FC-IL-1ra转化根癌农杆菌GV3101并侵染胡萝卜悬浮细胞,筛选得到的阳性细胞24孔板培养1周后,检测上清中FC-IL-1ra蛋白的表达。方法:用PCR的方法
【机 构】
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浙江省立同德医院中西医结合肿瘤研究所
【基金项目】
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浙江省科技厅科研基金资助项目(2011F10043)
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目的:构建植物双元表达载体pMCP0-FC-IL-1ra转化根癌农杆菌GV3101并侵染胡萝卜悬浮细胞,筛选得到的阳性细胞24孔板培养1周后,检测上清中FC-IL-1ra蛋白的表达。方法:用PCR的方法扩增得到含组织型纤溶酶原激活物(tPA)分泌型信号肽的FC-IL-1ra片段,并将其连接至测序载体pGEM-T Easy中,测序正确后将FC-IL-1ra片段酶切连接至植物表达载体pMCP0中,经PCR及酶切验证插入片段的正确性。重组质粒经农杆菌GV3101介导转染胡萝卜悬浮细胞,经潮霉素筛选得到阳性克隆,
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