芦笋基因组DNA提取与ISSR反应体系的优化

来源 :江西农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guanenyu
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ISSR标记技术在芦笋上目前还未见相关的研究报道。本研究在改进芦笋基因组DNA提取方法基础上,以芦笋基因组总DNA为模板,对芦笋ISSR反应体系的重要参数进行优化试验,建立了一套适用于芦笋稳定可靠、重复性强的ISSR反应体系:25μL的反应体系中,模板DNA量50 ng、Mg2+浓度2.0 mmol/L、正反引物各0.2μmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、TaqDNA聚合酶1 U以及1×Buffer。 ISSR marker technology in asparagus has yet to see the relevant research reports. In this study, based on improving genomic DNA extraction methods of Asparagus officinalis, the optimal parameters of ISSR reaction system of Asparagus officinalis were optimized by using the total DNA of Asparagus officinalis genomic DNA as template, and a set of ISSR reaction system suitable for stable and reproducible asparagus was established. The amount of template DNA was 50 ng, the concentration of Mg2 + was 2.0 mmol / L, the primers were 0.2 μmol / L, 0.2 mmol / L dNTPs, 1 U Taq DNA polymerase and 1 × Buffer, respectively.
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