【摘 要】
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目的:建立HPLC-MS/MS法测定大鼠角膜中环孢素A浓度。方法:角膜样品匀浆后以固相萃取法处理样品,以环孢素D为内标物,采用内标法进行HPLC-MS/MS分析。采用Waters Xterra MS C18
【机 构】
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河南省眼科研究所,郑州大学药学院,
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目的:建立HPLC-MS/MS法测定大鼠角膜中环孢素A浓度。方法:角膜样品匀浆后以固相萃取法处理样品,以环孢素D为内标物,采用内标法进行HPLC-MS/MS分析。采用Waters Xterra MS C18(3.5μm,13.0 mm×50 mm)色谱柱,流动相为混合溶液[甲酸-甲醇-4 mmol.L-1醋酸铵溶液(0.2∶10∶100)]-甲醇(15∶85)。电离方式为ESI正离子模式;离子采集方式为选择性离子模式(SIR,环孢素A:m/z 1220.2,环孢素D:m/z 1233.8)。结果:角膜匀浆液中环孢素A检测方法的线性范围为0.00576～0.288μg.mL-1(r=0.9993),大鼠角膜中环孢素A的平均提取回收率接近80%(n=5),方法回收率为87.9%～113.6%,批内RSD(n=5)及批间RSD(n=15)均小于15%。结论:本方法专属性强,准确度高、重复性好,可快速准确地测定大鼠角膜中环孢素A的浓度。
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