探讨干扰素调节因子-1(IRF-1)调控P38 MAPK信号通路对小鼠肝缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制。
方法采用随机数字表法将C57BL/6小鼠分为4组，每组10只，建立小鼠肝IRI模型。(1)Ad-GFP组：在建立肝IRI模型前(术前)6 h经小鼠尾静脉注射GFP对照病毒液40 μl；(2)Ad-IRF-1组：于术前6 h注射高表达IRF1的病毒液40 μl；(3)Ad-IRF-1＋SB203580组(实验组)：于术前6 h注射高表达IRF-1的病毒液40 μl，同时经腹腔注射SB203580 2 mg/kg；(4)对照组：于术前6 h注射等体积生理盐水。检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的变化，HE染色观察肝组织病理学改变，TUNEL法检测肝细胞凋亡情况，免疫组织化学染色法检测肝组织PCNA的表达情况。用AML12细胞建立模拟IRI模型。将细胞分为对照组、GFP-NC组、GFP-IRF-1组、siRNA-NC组和IRF-1 siRNA组。采用蛋白质印迹法检测IRF-1、P38、p-P38、Caspase-3蛋白的表达。
结果与Ad-GFP组相比，Ad-IRF-1组小鼠血清ALT和AST升高(P<0.05)；病理学检查见肝细胞肿胀，肝窦狭窄，片状坏死及红细胞淤积，肝组织结构破坏严重；肝细胞凋亡率增高(P<0.05)；PCNA呈弱表达或不表达。实验组较Ad-IRF-1组肝损伤减轻，肝细胞凋亡减少(P<0.05)，PCNA表达增多。此外，GFP-IRF-1组AML12细胞的IRF-1、p-P38、Caspase-3蛋白表达水平明显高于GFP-NC组(P<0.05)；IRF-1 siRNA组的IRF-1、p-P38、Caspase-3蛋白表达水平明显低于siRNA-NC组(P<0.05)。
结论IRF-1的表达增加加重了小鼠肝脏的IRI，其机制可能与IRF-1激活P38 MAPK通路，进而加重肝细胞凋亡有关。抑制IRF-1表达或P38活性能够减轻小鼠肝脏的IRI。