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观察RNA干扰(RNAi)沉默成年大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的实验可能性和转染效率。
方法构建靶向HIF-1α小干扰RNA基因,并转染到成年大鼠细胞中。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成年大鼠心肌细胞的HIF-1αm RNA水平变化,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度的作用下大鼠心肌细胞活力,转染后24 h内荧光显微镜检测转染对照的转染效果。
结果转染小干扰RNA(siRNA)结果显示si-r-HIF-1α的沉默有效性达到73%,按此浓度sir-HIF-1α和脂质体转染的心肌细胞最佳转染标本。
结论HIF-1αsiRNA可显著降低成年大鼠心肌细胞中HIF-1α表达,而且转染效率很高。