低浓度百草枯诱导小鼠小胶质细胞异常活化的M1/M2表型变化

• 作 者: 李颖颖 武坷鑫 田甜 王一帆 闫伟广 黄敏
• 机 构: 750004 银川，宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生学系,750004 银川，宁夏医科大学公共卫生与管理学院职业卫生与环境卫生学系,750004 银川，宁夏医科大学公共卫生与管理学院职
• 出 处: 中华劳动卫生职业病杂志
• 发表日期: 2019年37期
• 关键词: 百草枯 小鼠 小胶质细胞 活化 表型 炎症

目的

观察低浓度百草枯（PQ）对小鼠小胶质细胞（BV2）的激活情况，探讨PQ对BV2细胞M1/M2表型变化的影响。

方法

以BV2细胞为模型，用终浓度0、0.015、0.03、0.06、0.12、0.24、0.48 μmol/L PQ及0.05 μmol/L 1-甲基-4-苯基吡啶离子（MPP⁺）处理细胞24 h，CCK8法测定细胞存活率；用终浓度0、0.015、0.03、0.06、0.12 μmol/L PQ及0.05 μmol/L MPP⁺处理细胞24 h，酶联免疫吸附（ELISA）法测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-1β含量，Transwell小室法测定细胞迁移能力，免疫荧光法和流式细胞仪测定细胞吞噬能力；用终浓度0、0.03、0.06、0.12 μmol/L PQ及0.05 μmol/L MPP⁺处理细胞24 h，蛋白免疫印迹（Western blot）法测定M1型BV2细胞标志物TNF-α、IL-6、IL-1β、一氧化氮合酶（iNOS）、CD86及M2型BV2细胞标志物Ⅰ型精氨酸酶（Arg-1）、甘露糖受体（CD206）的蛋白表达水平。

结果

与0 μmol/L PQ组比较，0.03~0.12 μmol/L PQ组BV2细胞增殖活性均明显升高，0.48 μmol/L PQ组增殖活性明显抑制，差异均有统计学意义（P<0.05）；0.03 μmol/L PQ处理24 h的BV2细胞增殖活性明显升高（P<0.05）；ELISA结果显示，与0 μmol/L PQ组比较，0.03、0.06 μmol/L PQ组BV2细胞上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β含量明显升高（P<0.05）；免疫荧光和流式细胞仪测定结果显示，与0 μmol/L PQ组比较，0.015、0.03、0.06 μmol/L PQ组细胞吞噬能力明显增强（P<0.05）；Transwell结果显示，0.03、0.06、0.12 μmol/L PQ组细胞侵袭能力较0 μmol/L PQ组明显升高（P<0.05）；Western blot结果显示，与0 μmol/L PQ组比较，0.03、0.06 μmol/L PQ组的M1型标志物TNF-α、IL-6、IL-1β、iNOS和CD86蛋白表达水平明显升高，0.06、0.12 μmol/L PQ组M2型标志物Arg-1、CD206蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。

结论

低浓度PQ可以异常激活BV2细胞，使得BV2细胞向促炎型M1型转化而抑制其向抗炎型M2型转化。