人胰岛素样生长因子在pET-DsbA载体中的克隆及表达

• 作 者: 陈德珩 李体远 朱莹 刘争红 毕晓 黄瑞芳 戴勇
• 机 构: 暨南大学医学院第二附属医院-深圳市人民医院
• 出 处: 北京生物医学工程
• 发表日期: 2006年4期
• 关键词: 胰岛素样生长因子 融合蛋白 表达 insulin-like growth factor fusion protein expression
• 基金项目: 深圳市科技局课题（20034013）资助

目的通过重组技术，对胰岛素样生长因子IGF-Ⅰ基因进行缺失、突变以获得最有利于高水平表达的IGF-ⅠcDNA。构建原核表达载体，并进行表达，以获得能够高水平表达高活性产物的基因工程菌珠。方法提取人肝脏组织总RNA，RT-PCR后琼脂糖电泳初步鉴定产物。将cDNA回收、补平后插入克隆质粒KS，酶切鉴定后，对IGF-Ⅰ基因进行序列分析。采用PCR法从克隆质粒中扩增IGF-Ⅰ片段，亚克隆至pET-DsbA原核表达载体，酶切鉴定，并进行序列测定。转化到大肠杆菌BL21（DE3）PLysS中，IPTG诱导表达，聚丙