猪IL-18基因原核表达载体的构建及表达

• 作 者: 裴仉福 陈瑞爱 温纳相 唐满华 朱文冠 李琳 程含波 唐秀英
• 机 构: 广东大华农动物保健品有限公司,广东温氏食品集团有限公司创新中心
• 出 处: 动物医学进展
• 发表日期: 2006年10期
• 关键词: 白细胞介素18 基因克隆 原核表达 猪 IL-18 gene cloning prokaryotic expression swine
• 基金项目: 广东温氏食品集团创新基金资助项目 .致谢：本试验得到了上海复旦悦达生物技术有限责任公司的指导和帮助,特此致谢!

以含新兴猪IL-18基因的真核质粒pcDNA3．1-pIL18为模板，扩增出新兴猪IL-18基因，将其定向克隆至原核表达载体pET32c和pET41c的SacI和KpnI位点，构建了原核表达载体pET32c-pIL18和pET41c-pIL18。经酶切和PCR鉴定，表明所构建的重组质粒为特异性新兴猪IL-18基因原核表达质粒。将该重组质粒转化大肠埃希菌BL21（DE3）细胞，筛选的阳性菌落经SDS-PAGE分析及Western-blotting分析，表明成功构建了表达重组猪IL-18的大肠埃希菌基因工程菌