力生长因子E肽对前交叉韧带成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响

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目的 研究力生长因子(mechano-growth factor,MGF)E肽对前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)成纤维细胞活力、迁移与侵袭的影响.方法 以ACL成纤维细胞为研究对象:(1)经不同浓度(0、10和100μg/L)MGF E肽处理细胞24 h后,去除培养基,换成1%血清浓度DMEM低糖培养基培养6和30h后,检测细胞活力、DNA含量、细胞凋亡、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性变化及Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL Ⅲ) mRNA表达;(2)使用不同浓度(0、5、10、20、50和100μ/L)MGF E肽处理ACL成纤维细胞48 h后,检测细胞活力与MMP-2活性,并利用划痕实验与Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭能力.结果 (1)6h时,10 μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-2、MMP-9活性,对细胞活力、增殖、凋亡及COL Ⅰ、COLⅢmRNA表达无影响.100 μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-2、MMP-9活性,并提高了COL Ⅰ、COLⅢ mRNA表达,但对细胞活力、增殖、凋亡无影响.30 h时,10 μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-9活性及COL Ⅰ、COL Ⅲ mRNA表达,对细胞活力、增殖、MMP-2活性及细胞凋亡无影响.100μg/L浓度MGF E肽显著促进MMP-9活性及COL Ⅲ mRNA表达,但对细胞活力、增殖、MMP-2活性、细胞凋亡、COL Ⅰ mRNA表达无显著性调控作用.(2) MGF E肽显著促进ACL成纤维细胞的迁移与侵袭,且呈一定程度浓度依赖性;迁移与侵袭过程可能依赖于MMP-2活性.结论 MGF E肽能够促进ACL成纤维细胞胞外基质的合成与降解,进一步提高了细胞的迁移与侵袭,有助于组织损伤修复过程中成纤维细胞向损伤部位迁移,对ACL组织修复再生与术后康复具有积极的调控作用.
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