【摘 要】
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目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌（E.coli）中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位
【机 构】
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中国医科大学第90期生物科学与生物技术系,中国医科大学第94期临床医学系,中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室
【基金项目】
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基金项目：国家自然科学基金资助项目（30771128）,中国博士后科研基金资助项目（20060390975）,辽宁省教育厅科学研究计划项目（20060959）
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目的构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌（E.coli）中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和NotI酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并转化E.coli DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAG
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