盐透析体外组装核小体及检测方法

• 作 者: 赵宏宇 柴荣 王成爱 蔡禄
• 机 构: 内蒙古大学物理科学与技术学院,内蒙古科技大学数理与生物工程学院
• 出 处: 河南师范大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2014年1期
• 关键词: 核小体定位 组蛋白 Biotin标记 nucleosome positioning octamer biotin labeling
• 基金项目: 国家自然科学基金（61072129）,内蒙古自然科学基金（2013MS0514）,内蒙古自治区博士研究生科研创新项目（B20131012610）,内蒙古科技大学创新基金（2010NC056）

核小体是构成真核生物染色质的基本结构单位，体内研究核小体及染色质结构受到诸多因素限制，体外重构核小体结构是研究与核小体及染色质结构相关课题的一种重要的方法手段．实验将ES1，CS1以及601DNA序列克隆到载体中，通过PCR大量扩增回收得到目的DNA条带，表达纯化了4种组蛋白且装配成组蛋白八聚体，在盐透析的条件下组装形成核小体结构，利用EB染色以及Biotin标记的方法分析检测了形成核小体的效率．结果显示，在盐透析的条件下，可以有效的组装形成核小体结构，而且随着组蛋白八聚体与DNA的比例增加，核小体的形成