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摘 要： 实验考核在微生物学教学中具有重要作用。标准化实验考核是公正、客观的考核学生学习效果、评价教学质量的重要手段。对临床微生物学基本技术进行标准化考核可进一步规范基本技术操作，以促进学生学习的主动性和积极性。
关键词： 临床微生物学 基本技术 实验考核 方法 应用
医学检验专业的学生毕业后大多从事医学检验和实验室工作，除了理论知识外，熟练的实验操作和技能是他们立足的基础。临床微生物学检验是医学检验专业的重要专业课，是一门实践性和应用性均很强的学科。随着感染性疾病类型的改变，新发和再发病原体的不断增加，临床微生物学在临床检验工作中占据重要地位，并对培养合格的临床微生物学检验的专业人才提出了更高要求［１］。另外，临床微生物学接触的多为病原微生物，必须树立“有菌观念”，保证“无菌操作”，充分掌握生物安全的相关知识，才能适应临床和科研工作。因此，在临床微生物学检验实验教学中，教师必须高度重视对学生的基本实验技能训练和培养良好的实验习惯，做到从头从严抓起，使学生熟练掌握各项基本实验技术，融会贯通，并加强探索和创新等科学素养的培养。
为提高教学质量，我们实行在完成微生物学基本技术教学后，对学生进行标准化实验考核。多年的经验显示，对微生物学基本技术进行标准化考核，不仅可评价学生对基本技术的掌握程度，进一步规范基本技术操作，促进学生学习的主动性和积极性，而且是评价和提高教学质量、推进教学改革的有力依据。
一、临床微生物学基本技术标准化实验考核内容及考核目标
在临床微生物学中，实验基本技术重要包括显微镜使用、革兰染色、培养基制备、消毒与灭菌、细菌分离与培养［2］。根据教学大纲和实际情况，我们选择革兰染色和分区划线两个项目作为实验考核项目，并要求在20分钟内完成操作并作出染色结果报告。其中革兰染色主要检查学生对革兰染色技术的掌握情况，染色结果判断和报告准确性，以及显微镜使用和维护；分区划线除了考核学生对分区划线技术的掌握情况外，还包括无菌操作、接种环使用、开/拿平皿及划线的手法、实验材料标记、清理台面等实验习惯的考核。
二、临床微生物学基本技术标准化实验考核方法
目前临床微生物学实验课都是小班教学，我院基本上是一个教师负责28—32名学生，每个年级由3—4位教师带教。为避免教师个人习惯和师承的差异，在临床微生物学实验教学中实行规范化带教，对教学内容、教学方法，以及实验操作基本技术等方面均进行统一。这样，可以有效避免因教师因素引起的差异，使标准化实验考核能顺利进行。
临床微生物学基本技能标准化实验考核，包括实验考核组织、标准化操作方法、标准化监考和记录、标准化评分标准、修正和预防措施。具体方法和操作过程如下。
1.实验考核组织
在实验课的第一堂课，即告知学生要进行基本技术考核。在考核前1周，教研室统一对学生讲解考核要求和纪律，考核内容及评分标准等文件。考前2天，实验室准备好考核用玻片、试管架、接种环、记号笔、培养基、各种试剂、显微镜等材料和仪器。考前1天转移考核用菌种，保证细菌处于对数生长期。教研室对参加考核的所有学生随机安排考试地点和时间，考核名单及具体安排于考前1天张贴在实验室门口，由非带教老师担任监考老师。
2.标准化实验考核内容
选择金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠埃希菌ATCC25922作为考试用菌种。每个学生一个菌种，编写不同号码。要求在20分钟内完成革兰染色和分区划线两个项目操作，并作出染色结果报告。
3.标准化操作方法
严格无菌操作。革兰染色包括做好标记，正确制片；自然干燥；火焰固定；结晶紫初染，卢戈碘液媒染，95%酒精脱色，稀释石碳酸复红复染；吸水纸吸干；油镜观察；结果报告；油镜和玻片清洗；台面整理。分区划线包括标记，划线的姿势；平皿打开的手法，平皿放置；平皿开口朝向；划线分布；放培养箱培养。
4.标准化监考和记录
按照考核安排表，学生在规定时间和地点进行操作并报告结果，每位教师在每个时间段负责3—4名学生，对学生的每一个操作进行监督并记录，当学生在油镜下找到细菌后，监考教师检查染色结果并记录。学生在记录单上填写染色结果报告并签名。加强考场纪律，用计时器提醒学生。教师不回答学生任何与考核有关的问题。
5.标准化评分标准
实验考核成绩以20分计，直接计入课程总成绩。分数分配如下。
（1）革兰染色技术9分。标记0.5分；制片1分；固定1分；染色步骤2分（结晶紫初染，卢戈碘液媒染，95%酒精脱色，稀释石碳酸复红复染每个步骤各0.5分）；染色结果正确1分；报告正确1分；显微镜使用和维护2分；玻片清洗及台面清理0.5分。
（2）分区划线9分。平皿底部标记0.5分；平皿放置0.5分；无菌操作2分（接种环灭菌及冷却、平皿开口朝向、单手开平皿、酒精灯正确使用各0.5分），划线姿势和手法1分；送培养箱培养1分；划线分布2分；分离结果2分（划线分布和分离结果由老师在培养后第二天评分）。
（3）其他2分。在规定时间20分钟内按要求完成所有操作。超时1分钟扣0.5分，超时2分钟扣1分，超时3分钟扣2分，超时4分钟扣3分，超时5分钟扣5分。超过5分钟未完成操作，参加补考。补考以总成绩为18分计，通过者实验考核成绩为12分。
6.修正和预防措施
对不会用显微镜（包括油镜下找不到视野，不会使用油镜等），结果报告错误（与镜下结果不符，如球菌报告为杆菌，红色报告为革兰阳性等）的学生，无论前面各项操作结果如何，一律重考。
考核结束后，进行分析并做总结。除了对学生考核成绩进行分析外，还特别注意在考核过程中出现的各种问题，并针对考核中常见的特殊性问题，在实验教学中加以改进和提高。
三、标准化实验考核应用体会
临床微生物学基本技术实验考核是以教学大纲为质量标准的考试，目的是检验学生是否达到教学大纲要求和学业成绩的差异。主要考核学生对常用临床微生物学实验技能的掌握程度。实验考核结果不仅可评价学生对临床微生物学知识和技术的掌握程度，而且是评价教师教学质量的有力依据。
对医学检验专业学生，我们一直非常重视他们的临床微生物学基本技能训练，在教学中做到以小组为单位，由带教教师讲解并进行操作示教。在学生自己操作过程中，教师在实验室内巡回，仔细观察学生操作，对不规范和错误的操作及时纠正，下课前总结并提醒学生在试验中出现的问题。由于学生普遍对医学检验检验专业和临床微生物学的认识，加上学生均知道要进行操作技术考核，绝大部分学生在实验过程中能做到较积极主动地学习。
自2005年开始建立标准化实验考核体系，2006年开始实践以来，我们发现建立和应用标准化的实验考核体系，一方面可更好地促进学生的学习积极性：实施标准化考核以来，学生对基本技术的重视较以往明显提高，每次实验中都认真操作，完全不需要教师像以前一样进行检查，真正做到自觉、认真，甚至有部分学生利用课余时间联系实验室进行强化联系。另一方面可使实验考核规范化，做到有据可依的评分，避免人为因素等诸多可变因素对学生成绩的影响，做到有据可依、客观、合理、公正地评价和评分。另外，由非带教教师进行监考和评分，避免了因带教教师个人喜好等因素影响学生成绩，也可进一步促进实验带教的规范化。
总之，与以前的实验考核比较，标准化实验考核体系不仅能进一步促进学生的学习积极性和独立解决问题的能力，标准化的评分标准使学生在完成考核后对自己的成绩已经心中有数，避免少数学生对自己成绩有意见的现象，而且能促进学生在操作过程中养成良好习惯。临床微生物学基本技术标准化实验考核是公正、客观考核学生学习效果、评价教学质量的重要手段。
参考文献：
［1］王跃，程曦，王频佳.临床检验微生物学课程体系改革的探索［J］.现代预防医学，2011，38（1）：73-74.
［2］洪秀华，刘运德.临床微生物学检验［M］.中国医药科技出版社，2010，第二版.
温州医学院高等教育教学改革研究项目JGEL2010030。
关键词： 临床微生物学 基本技术 实验考核 方法 应用
医学检验专业的学生毕业后大多从事医学检验和实验室工作，除了理论知识外，熟练的实验操作和技能是他们立足的基础。临床微生物学检验是医学检验专业的重要专业课，是一门实践性和应用性均很强的学科。随着感染性疾病类型的改变，新发和再发病原体的不断增加，临床微生物学在临床检验工作中占据重要地位，并对培养合格的临床微生物学检验的专业人才提出了更高要求［１］。另外，临床微生物学接触的多为病原微生物，必须树立“有菌观念”，保证“无菌操作”，充分掌握生物安全的相关知识，才能适应临床和科研工作。因此，在临床微生物学检验实验教学中，教师必须高度重视对学生的基本实验技能训练和培养良好的实验习惯，做到从头从严抓起，使学生熟练掌握各项基本实验技术，融会贯通，并加强探索和创新等科学素养的培养。
为提高教学质量，我们实行在完成微生物学基本技术教学后，对学生进行标准化实验考核。多年的经验显示，对微生物学基本技术进行标准化考核，不仅可评价学生对基本技术的掌握程度，进一步规范基本技术操作，促进学生学习的主动性和积极性，而且是评价和提高教学质量、推进教学改革的有力依据。
一、临床微生物学基本技术标准化实验考核内容及考核目标
在临床微生物学中，实验基本技术重要包括显微镜使用、革兰染色、培养基制备、消毒与灭菌、细菌分离与培养［2］。根据教学大纲和实际情况，我们选择革兰染色和分区划线两个项目作为实验考核项目，并要求在20分钟内完成操作并作出染色结果报告。其中革兰染色主要检查学生对革兰染色技术的掌握情况，染色结果判断和报告准确性，以及显微镜使用和维护；分区划线除了考核学生对分区划线技术的掌握情况外，还包括无菌操作、接种环使用、开/拿平皿及划线的手法、实验材料标记、清理台面等实验习惯的考核。
二、临床微生物学基本技术标准化实验考核方法
目前临床微生物学实验课都是小班教学，我院基本上是一个教师负责28—32名学生，每个年级由3—4位教师带教。为避免教师个人习惯和师承的差异，在临床微生物学实验教学中实行规范化带教，对教学内容、教学方法，以及实验操作基本技术等方面均进行统一。这样，可以有效避免因教师因素引起的差异，使标准化实验考核能顺利进行。
临床微生物学基本技能标准化实验考核，包括实验考核组织、标准化操作方法、标准化监考和记录、标准化评分标准、修正和预防措施。具体方法和操作过程如下。
1.实验考核组织
在实验课的第一堂课，即告知学生要进行基本技术考核。在考核前1周，教研室统一对学生讲解考核要求和纪律，考核内容及评分标准等文件。考前2天，实验室准备好考核用玻片、试管架、接种环、记号笔、培养基、各种试剂、显微镜等材料和仪器。考前1天转移考核用菌种，保证细菌处于对数生长期。教研室对参加考核的所有学生随机安排考试地点和时间，考核名单及具体安排于考前1天张贴在实验室门口，由非带教老师担任监考老师。
2.标准化实验考核内容
选择金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠埃希菌ATCC25922作为考试用菌种。每个学生一个菌种，编写不同号码。要求在20分钟内完成革兰染色和分区划线两个项目操作，并作出染色结果报告。
3.标准化操作方法
严格无菌操作。革兰染色包括做好标记，正确制片；自然干燥；火焰固定；结晶紫初染，卢戈碘液媒染，95%酒精脱色，稀释石碳酸复红复染；吸水纸吸干；油镜观察；结果报告；油镜和玻片清洗；台面整理。分区划线包括标记，划线的姿势；平皿打开的手法，平皿放置；平皿开口朝向；划线分布；放培养箱培养。
4.标准化监考和记录
按照考核安排表，学生在规定时间和地点进行操作并报告结果，每位教师在每个时间段负责3—4名学生，对学生的每一个操作进行监督并记录，当学生在油镜下找到细菌后，监考教师检查染色结果并记录。学生在记录单上填写染色结果报告并签名。加强考场纪律，用计时器提醒学生。教师不回答学生任何与考核有关的问题。
5.标准化评分标准
实验考核成绩以20分计，直接计入课程总成绩。分数分配如下。
（1）革兰染色技术9分。标记0.5分；制片1分；固定1分；染色步骤2分（结晶紫初染，卢戈碘液媒染，95%酒精脱色，稀释石碳酸复红复染每个步骤各0.5分）；染色结果正确1分；报告正确1分；显微镜使用和维护2分；玻片清洗及台面清理0.5分。
（2）分区划线9分。平皿底部标记0.5分；平皿放置0.5分；无菌操作2分（接种环灭菌及冷却、平皿开口朝向、单手开平皿、酒精灯正确使用各0.5分），划线姿势和手法1分；送培养箱培养1分；划线分布2分；分离结果2分（划线分布和分离结果由老师在培养后第二天评分）。
（3）其他2分。在规定时间20分钟内按要求完成所有操作。超时1分钟扣0.5分，超时2分钟扣1分，超时3分钟扣2分，超时4分钟扣3分，超时5分钟扣5分。超过5分钟未完成操作，参加补考。补考以总成绩为18分计，通过者实验考核成绩为12分。
6.修正和预防措施
对不会用显微镜（包括油镜下找不到视野，不会使用油镜等），结果报告错误（与镜下结果不符，如球菌报告为杆菌，红色报告为革兰阳性等）的学生，无论前面各项操作结果如何，一律重考。
考核结束后，进行分析并做总结。除了对学生考核成绩进行分析外，还特别注意在考核过程中出现的各种问题，并针对考核中常见的特殊性问题，在实验教学中加以改进和提高。
三、标准化实验考核应用体会
临床微生物学基本技术实验考核是以教学大纲为质量标准的考试，目的是检验学生是否达到教学大纲要求和学业成绩的差异。主要考核学生对常用临床微生物学实验技能的掌握程度。实验考核结果不仅可评价学生对临床微生物学知识和技术的掌握程度，而且是评价教师教学质量的有力依据。
对医学检验专业学生，我们一直非常重视他们的临床微生物学基本技能训练，在教学中做到以小组为单位，由带教教师讲解并进行操作示教。在学生自己操作过程中，教师在实验室内巡回，仔细观察学生操作，对不规范和错误的操作及时纠正，下课前总结并提醒学生在试验中出现的问题。由于学生普遍对医学检验检验专业和临床微生物学的认识，加上学生均知道要进行操作技术考核，绝大部分学生在实验过程中能做到较积极主动地学习。
自2005年开始建立标准化实验考核体系，2006年开始实践以来，我们发现建立和应用标准化的实验考核体系，一方面可更好地促进学生的学习积极性：实施标准化考核以来，学生对基本技术的重视较以往明显提高，每次实验中都认真操作，完全不需要教师像以前一样进行检查，真正做到自觉、认真，甚至有部分学生利用课余时间联系实验室进行强化联系。另一方面可使实验考核规范化，做到有据可依的评分，避免人为因素等诸多可变因素对学生成绩的影响，做到有据可依、客观、合理、公正地评价和评分。另外，由非带教教师进行监考和评分，避免了因带教教师个人喜好等因素影响学生成绩，也可进一步促进实验带教的规范化。
总之，与以前的实验考核比较，标准化实验考核体系不仅能进一步促进学生的学习积极性和独立解决问题的能力，标准化的评分标准使学生在完成考核后对自己的成绩已经心中有数，避免少数学生对自己成绩有意见的现象，而且能促进学生在操作过程中养成良好习惯。临床微生物学基本技术标准化实验考核是公正、客观考核学生学习效果、评价教学质量的重要手段。
参考文献：
［1］王跃，程曦，王频佳.临床检验微生物学课程体系改革的探索［J］.现代预防医学，2011，38（1）：73-74.
［2］洪秀华，刘运德.临床微生物学检验［M］.中国医药科技出版社，2010，第二版.
温州医学院高等教育教学改革研究项目JGEL2010030。