【摘 要】
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采用PCR方法从三角帆蚌外套膜cDNA中扩增perlucin基因的开放阅读框,连接到pET-28a表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达重组融合蛋白pET-28a-Hcperlucin。通过优化培
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水水产种质资源重点实验室
【基金项目】
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国家科技支撑计划课题（2012BAD26804）,上海市高校知识服务平台项目（ZF1206）
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采用PCR方法从三角帆蚌外套膜cDNA中扩增perlucin基因的开放阅读框,连接到pET-28a表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达重组融合蛋白pET-28a-Hcperlucin。通过优化培养温度、IPTG浓度以及诱导时间,得出重组融合蛋白的最佳表达条件分别为：37℃、0.1mmol/LIPTG、6h。重组融合蛋白主要以包涵体形式存在。SDS-PAGE和Westernblot分析结果表明,表达重组融合蛋白的相对分子量与预测值相符,约为21kD,并能与鼠抗His-tag单克隆抗体
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