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采用正交设计的方法对油松ISSR-PCR反应体系5因素（ Taq DNA聚合酶、Mg2＋、模板DNA、dNTPs、引物的浓度）在4水平上进行优化试验，PCR结果用SPSS数据软件分析。结果表明：各因素不同水平对PCR反应结果都有显著的影响，且除dNTP因素外其他4因素影响均较大；筛选出各反应因素的最佳水平，建立油松ISSR-PCR的最佳反应体系（20μL）为：Taq DNA聚合酶1 U、模板5μg/μL、Mg2＋2．0 mmol/L、dNTP 0．20 mmol/L、引物0．4μmol/L；进行梯度退火试