【摘 要】
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目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体。方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的o
【机 构】
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郑州大学第一附属医院儿科,郑州大学第三附属医院儿内科,美国圣路易斯华盛顿大学医学院血液系
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目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体。方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的oligo DNA,退火形成双链DNA,与经XbaⅠ和XhoⅠ酶切后的pFLRu-GFP载体连接构建成pFLRu-U6-shPTEN慢病毒载体。在此基础上,引入外源设计的PTENmRNA,与经EcoRⅠ和BamHⅠ酶切后的pFLRu-U6-shPTEN载体连接,从而产生在同一个载体内兼有人PTEN基
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