【摘 要】
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目的:探讨靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR的miRNA在慢性粒细胞白血病(CML)临床标本、K562及阿霉素耐药株K562A细胞的表达,筛选关联性较强miRNA,为慢粒分期、治疗及预后奠定基础.方法:利用生物学信息软件分析选出miR-100、miR-144、miR-199a-3p、miR-221和miR-222这5个靶向mTOR的miRNA.将收集的临床CML标本及正常阴性对照标本利用Ficoll单个核细胞分离液分离单个核细胞,提取miRNA并逆转录成cDNA,实时荧光定量PCR监测miRNA的表达.收
【机 构】
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贵州省人民医院,贵阳 550002
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目的:探讨靶向哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR的miRNA在慢性粒细胞白血病(CML)临床标本、K562及阿霉素耐药株K562A细胞的表达,筛选关联性较强miRNA,为慢粒分期、治疗及预后奠定基础.方法:利用生物学信息软件分析选出miR-100、miR-144、miR-199a-3p、miR-221和miR-222这5个靶向mTOR的miRNA.将收集的临床CML标本及正常阴性对照标本利用Ficoll单个核细胞分离液分离单个核细胞,提取miRNA并逆转录成cDNA,实时荧光定量PCR监测miRNA的表达.收集常规培养对数生长期K562、K562A细胞,提取miRNA并逆转录后荧光定量检测miR-100、miR-144、miR-199a-3p、miR-221和miR-222在K562、K562A细胞中的表达.结果:CML样本与正常阴性对照样本相比,5个指标miR-100、miR-144、miR-199a-3p、miR-221、miR-222在8例CML样本中的表达呈上调趋势.在细胞株样本中,miR-100和miR-222在K562和阿霉素耐药株K562A中的表达无明显趋势差异,说明miR-100和miR-222可能与K562及K562A细胞不存在相关性.与K562比较,阿霉素耐药株K562A中的miR-144和miR-221表达呈上升趋势,miR-199a-3p呈下降趋势,说明miR-144、miR-221及miR-199a-3p可能与K562A耐药相关.结论:miR-100、miR-144、miR-199a-3p、miR-221、miR-222在8例CML样本中的表达呈上调趋势.miR-144、miR-221及miR-199a-3p可能与K562A耐药相关.
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