【摘 要】
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目的:初步研究艳山姜挥发油(EOFAZ)经肺部定量给药后对猪胰弹性蛋白(PPE)诱导小鼠产生肺气肿的防治作用,并探讨其相关机制.方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,EOFAZ低、高剂量组(2,20mg·kg-1)及地塞米松组(1mg·kg-1).采用肺部给药定量雾化器每隔7d给予PPE诱导小鼠产生肺气肿,共给药4次.在此期间,隔天使用肺部给药定量雾化器定量给予EOFAZ,共给药14次.小鼠肺部经苏木素-伊红(HE)染色用于观察各组形态学变化并测量和计算平均内衬间距(MLI),采用酶联免疫吸附
【机 构】
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贵州医科大学贵州省特色天然药物资源高效利用工程中心,贵州省高等学校天然药物药理与成药性评价特色重点实验室,贵州医科大学-贵阳市联合重点实验室,天然药物资源优效利用重点实验室,药学院,贵阳550025
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目的:初步研究艳山姜挥发油(EOFAZ)经肺部定量给药后对猪胰弹性蛋白(PPE)诱导小鼠产生肺气肿的防治作用,并探讨其相关机制.方法:C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,EOFAZ低、高剂量组(2,20mg·kg-1)及地塞米松组(1mg·kg-1).采用肺部给药定量雾化器每隔7d给予PPE诱导小鼠产生肺气肿,共给药4次.在此期间,隔天使用肺部给药定量雾化器定量给予EOFAZ,共给药14次.小鼠肺部经苏木素-伊红(HE)染色用于观察各组形态学变化并测量和计算平均内衬间距(MLI),采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血浆中肿瘤坏死因子-a(TNF-a),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)的含量,通过生化试剂盒测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核因子E2相关因子2(Nrf2),醌氧化还原酶1(NQ01),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2的表达.结果:肺部形态学观察及MLI检测结果显示,与正常组比较,模型组小鼠肺部出现明显的炎症浸润、肺泡腔扩大和融合的现象,MLI升高(P＜0.05);与模型组比较,EOFAZ肺部定量给药后能有效地缓解PPE引起的肺泡腔扩张、肺部炎症细胞浸润及肺组织细胞凋亡等病理变化,MLI也出现下降(P＜0.05).ELISA结果显示,模型组小鼠的炎症水平显著升高(P＜0.01),肺部定量给予EOFAZ后血浆中TNF-a,IL-1β和IL-6的含量均下降(P＜0.01).氧化应激结果显示,模型组小鼠的氧化应激水平显著升高(P＜0.01),肺部定量给予EOFAZ后提高了肺组织中SOD,CAT的活力(P＜0.01)和降低MDA的含量(P＜0.01).Western blot结果显示,与正常组比较,模型组凋亡蛋白明显升高(P＜0.01),抗氧化应激蛋白Nrf2,NQO1表达明显下降(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,肺部定量给予EOFAZ后凋亡蛋白Bax/Bcl-2的蛋白相对表达量下降(P＜0.01),抗氧化应激蛋白Nrf2,NQO1的表达增加(P＜0.05).结论:EOFAZ通过肺部定量给药能够有效降低炎症和氧化应激水平,减少肺组织细胞凋亡,缓解肺气肿的发生和发展,其抗氧化机制与提高Nrf2及其下游NQ01蛋白表达密切相关.
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