【摘 要】
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目的探讨含p53基因的质粒pC53-SN3转染的树突细胞(DC)体外诱导特异性抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞(CTL).方法应用脂质体介导将质粒pC53-SN3转染肺癌患者单个核细胞[HLA-A2+]衍生的DC,然后与未经纯化的自体T细胞混合培养以诱导CTL(T-pC53-SN3),并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其对p53基因突变的HLA-A2+人肺癌细胞系Calu-6的杀伤活性.结果用质粒pC
【机 构】
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300060,天津医科大学附属肿瘤医院,
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目的探讨含p53基因的质粒pC53-SN3转染的树突细胞(DC)体外诱导特异性抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞(CTL).方法应用脂质体介导将质粒pC53-SN3转染肺癌患者单个核细胞[HLA-A2+]衍生的DC,然后与未经纯化的自体T细胞混合培养以诱导CTL(T-pC53-SN3),并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其对p53基因突变的HLA-A2+人肺癌细胞系Calu-6的杀伤活性.结果用质粒pC53-SN3转染DC后,发现CD1a、CD83显著升高,转染前表达率分别为(5.45±0.89)%、(3.26±0.47)%,转染后分别为(52.15±11.56)%、(25.78±12.35)%.但CD86、CD40、HLA-DR等DC相关标志与转染前无明显改变.LDH释放实验显示,以Calu-6作为靶细胞,T-pC53-SN3诱导的杀伤作用显著高于T-IL-2(IL-2 100 U/ml刺激外周血单个核细胞产生的CTL),效靶比为10∶1时其杀伤活性分别为(56.79±15.67)%和(39.33±9.88)%.同时细胞表面标记检测可见T-pC53-SN3细胞中以CD8+细胞为主,且CD69、CD45RO/CD8表达均显著升高.结论 p53基因修饰的DC对p53突变的人肺癌细胞系可有效诱导HLA-A2限制的特异性CTL.
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