【摘 要】
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目的分离培养昆明小鼠成纤维细胞,研究其体外生长特性并用于胚胎干细胞培养。方法消化法分离培养获得昆明小鼠胚胎成纤维细胞,利用MTT法绘制各代细胞生长曲线,免疫荧光对各代
【机 构】
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贵阳护理职业学院解剖学教研室,贵州医科大学组织学与胚胎学教研室
【基金项目】
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贵州省科技厅基金[黔科合J字(2015)2011号];贵州省优秀科技教育人才省长专项资金项目[黔省专合字(2012)41号]
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目的分离培养昆明小鼠成纤维细胞,研究其体外生长特性并用于胚胎干细胞培养。方法消化法分离培养获得昆明小鼠胚胎成纤维细胞,利用MTT法绘制各代细胞生长曲线,免疫荧光对各代细胞进行细胞骨架分析;用不同浓度丝裂霉素C(10μg/mL、20μg/mL和30μg/mL)分别处理MEFs1、2、3h,MTT法筛选饲养层制备的最佳条件,制备饲养层用于小鼠胚胎干细胞的培养。结果分离的小鼠胚胎成纤维细胞3~5代细胞增殖能力较好;1~3代细胞微管微丝排列整齐,5代以后的细胞微管微丝排列紊乱;10μg/mL丝裂霉素C处理2h有利
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