MsiR高可溶性蛋白突变株的筛选

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外源蛋白在表达宿主中的可溶性是影响其应用的关键因素。采用mCherry报告基因,构建MsiR—mCherry融合蛋白,通过测定荧光值定性定量的测定MsiR蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达量。随后,利用易错聚合酶链反应(Errorprone-PCR)和致突变菌株(XL1-Red)两种方式构建fmsiR-mCherry基因突变文库,经筛选得到T4株在大肠杆菌中以37℃作为诱导温度下可溶性明显提高的蛋白突变体。
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