稳定表达HPV16 E6 siRNA细胞克隆的建立

• 作 者: 王文娟 王言奎 杨玲 徐冰 王宁 罗兵 戴淑真
• 机 构: 青岛大学医学院附属医院妇科,青岛大学医学院微生物学教研室
• 出 处: 青岛大学医学院学报
• 发表日期: 2007年4期
• 关键词: RNA干扰 DNA探针 HPV 宫颈肿瘤 克隆细胞 RNA interference DNA probes HPV uterine cervical ne
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30571957）

目的构建针对HPV16 E6基因的逆转录病毒载体，感染HPV16阳性宫颈癌细胞，筛选稳定表达HPV16 E6 siRNA的细胞克隆。方法采用DNA重组技术构建表达靶向HPV16E6基因的pSUPER．retro RNAi逆转录病毒载体，脂质体法将逆转录病毒载体转染人包装细胞PA317，G418筛选稳定产生逆转录病毒的细胞克隆，收集病毒上清，感染靶细胞SiHa，G418筛选出稳定表达HPV16 E6 siRNA细胞克隆，RTPCR检测细胞中E6 mRNA表达，细胞增殖实验检测细胞增殖力。结果获及稳定产生逆转