人干燥综合征B抗原重组体的构建及融合表达

• 作 者: 李倩 高扬 倪安平 于孟学 朱立平 刘音 李永哲 林嘉友 甘
• 机 构: 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科,中国医学科学院基础医学研究所免疫学研究室
• 出 处: 医学分子生物学杂志
• 发表日期: 2008年2期
• 关键词: 人干燥综合征B抗原 CDNA克隆 重组体 融合表达 human sjogren＇s syndrome antigen B eDNA clone recomb
• 基金项目: 国家高技术研究发展计划（863计划）（No.20024032）

目的克隆人干燥综合征B抗原基因（human sjogren’s syndrome antigenB，SSB）并进行原核表达，为使用重组抗原用于自身抗体的临床检测奠定基础。方法根据GenBank中检索到的人SSB cDNA序列，在5′非编码区和3′非编码区设计特异性引物，提取人源HeLa细胞总RNA作为模板，逆转录RT-PCR扩增人干燥综合征B抗原cDNA。PCR产物纯化后连接至载体PET-30a，导人大肠埃希菌DH5α，构建重组质粒PET-30a-SSB。对重组质粒进行酶切鉴定，选择阳性克隆测序。重组质粒