IL-3基因修饰的G422胶质母细胞瘤细胞体内致瘤性的改变

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangyc726
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目的:探讨IL-3基因治疗脑胶质瘤的可能性。方法:以重组的复制缺陷型腺病毒作为基因转染的载体,在体外将鼠IL-3基因转染G422小鼠胶质母细胞瘤细胞,RT-PCR检测IL-3基因转染的G422细胞中是否有转基因的mRNA转录;ELISA法检测细胞培养上清液中分泌的IL-3的水平;MTT法检测细胞的体外增殖能力;IL-3基因转染G422细胞接种小鼠皮下,观察肿瘤的生长和小鼠的存活期,并检测小鼠脾细胞诱导的LAK,CTL的杀伤活性。结果:IL-3基因转染的G422细胞中有目的基因mRNA的转录,分泌高水平的IL-3。IL-3基因转染的G422细胞的体外增殖能力没有显著的改变。皮下接种后,肿瘤生长受抑制,荷瘤小鼠的存活期延长,脾细胞诱导的LAK,CTL杀伤活性增强。结论:IL-3基因转染的G422细胞的体内致瘤性降低,能激活宿主的抗肿瘤免疫反应 Objective: To investigate the possibility of IL-3 gene therapy for gliomas. Methods: The recombinant replication-defective adenovirus was used as a vector for gene transfection to transfect murine IL-3 gene into G422 mouse glioblastoma cells in vitro. RT-PCR was used to detect IL-4 transfected G422 cells. Whether there is transgene mRNA transcription; ELISA method to detect the level of IL-3 secreted in cell culture supernatant; MTT method to detect cell proliferation in vitro; IL-3 gene transfected G422 cells inoculated subcutaneously in mice to observe the tumor Growth and survival of mice, and detection of LAK and CTL killing activity induced by mouse spleen cells. RESULTS: The mRNA of the target gene was transfected into G422 cells transfected with IL-3 gene and secreted high levels of IL-3. There was no significant change in the in vitro proliferative capacity of G422 cells transfected with IL-3 gene. After subcutaneous inoculation, tumor growth was inhibited, tumor-bearing mice survived longer, and LAK and CTL killing activity induced by splenocytes increased. Conclusion: The tumorigenicity of G422 cells transfected with IL-3 gene is reduced in vivo, and can activate the host’s anti-tumor immune response.
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