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目的探讨不同软骨分离方法获得软骨细胞的细胞存活率及细胞数量,优化软骨细胞获取方法。方法采用SD大鼠20只,获取关节软骨,机械剪碎后称重,每组使用相同重量的软骨组织(1g),4组采用不同方法获取软骨细胞:实验1组:0.25%胰蛋白酶消化3h,0.2%Ⅱ型胶原酶消化10h。实验2组:4℃下0.25%胰蛋白酶消化12h,0.25%胰蛋白酶消化72h。实验3组:0.2%Ⅱ型胶原酶消化16h。实验4组:0.08%Ⅱ型胶原酶消化12h。加入原代细胞培养液进行体外培养增殖。使用化学特殊染色法鉴定获取细胞是否为软骨细胞。