【摘 要】
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目的构建人促甲状腺激素受体(TSHR) A亚基的原核表达载体pET102/D-TOPO/TSHR A,在大肠杆菌中表达并分析其免疫活性。方法采用逆转录—聚合酶链式反应扩增TSHR A基因编码序列,
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81241029),兰州大学第二医院院内课题(bdkyjj-05)
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目的构建人促甲状腺激素受体(TSHR) A亚基的原核表达载体pET102/D-TOPO/TSHR A,在大肠杆菌中表达并分析其免疫活性。方法采用逆转录—聚合酶链式反应扩增TSHR A基因编码序列,定向连接到载体pET102/D-TOPO中,经聚合酶链式反应、酶切、测序鉴定后转化大肠杆菌BL21 StarTM(DE3);异丙基硫代-β-D-半乳糖苷诱导表达TSHR A亚基融合蛋白,超声裂解细菌,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western blotting鉴定,在变性、复性、镍柱纯化后,目的蛋白与Graves患
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