pSIREN-HIF-1α/shRNA表达载体的构建与鉴定

• 作 者: 赵留芳 张书萍 李晓江 任艳鑫 张康 喻博 马静 隋军
• 机 构: 昆明医科大学第三附属医院、云南省肿瘤医院头颈外科
• 出 处: 昆明医科大学学报
• 发表日期: 2013年10期
• 关键词: RNA干扰 鼻咽癌 质粒 HIF-1Α 短发卡RNA RNA interference Nasopharyngeal darcinoma Plasmids

目的：构建pSIREN-HIF-1α/shRNA重组质粒并测序鉴定，为下一步探索鼻咽癌基因治疗的RNA干扰（RNA interference， RNAi）途径奠定基础。方法根据基因库 HIF-1αcDNA 序列（NM_001530/NM_181054）以及Reynolds设计原则，设计并合成两端有酶切位点的60个碱基的寡核苷酸链，退火成互补双链后将退火产物与RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体链接后，热转化至大肠杆菌JM109菌株中，提取质粒进行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定，测序