牡蛎主要过敏原原肌球蛋白的重组表达及鉴定

• 作 者: 张江涛 李国明 方磊 刘艳 崔欣悦 鲁军
• 机 构: 中国食品发酵工业研究院
• 出 处: 中国食品添加剂
• 发表日期: 2019年1期
• 关键词: 牡蛎 原肌球蛋白(Crag 1) 重组 表达条件 鉴定
• 基金项目: 国家自然科学基金项目(31671963);宁波市“十三五”海洋经济创新发展示范项目(NBHY-2017-S1);十三五国家重点研发计划(2016YFD0400604);中山市协同创新中心认定资助项目(2016C1015)

牡蛎的主要过敏原是Crag 1蛋白(属于一种原肌球蛋白),克隆牡蛎原肌球蛋白Crag 1基因,导入大肠杆菌(BL21)中,然后筛选重组菌株。通过SDS-PAGE探究了重组菌株中Crag 1蛋白的最佳诱导表达条件,15℃下诱导16h。然后通过Western印迹、SDS-PAGE、质谱(MALDI-TOF-MS)、圆二色(CD)光谱等方法从His-tag、相对分子量、肽段比对以及二级结构上综合鉴定了重组Crag 1蛋白的准确性。本实验成功重组表达并鉴定了牡蛎主要过敏原Crag 1蛋白,为接下来的牡蛎脱敏实验以