【摘 要】
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目的观察过度表达超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型(HCN)4对乳鼠心肌细胞电生理特性的影响.方法酶解法分离20只乳鼠的原代心肌细胞并进行培养,用含HCN4基因的重组腺
【机 构】
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北京大学人民医院心电生理室,北京大学基础医学院生物化学与分子生物学系
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目的观察过度表达超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型(HCN)4对乳鼠心肌细胞电生理特性的影响.方法酶解法分离20只乳鼠的原代心肌细胞并进行培养,用含HCN4基因的重组腺病毒AdHCN4感染心肌细胞,以未感染细胞作为对照组,通过RT-PCR及细胞免疫荧光方法检测心肌细胞中HCN4基因在mRNA和蛋白质水平的表达,用全细胞膜片钳方法测定转染HCN4基因的心肌细胞的动作电位和起搏电流If.结果AdHCN4感染组心肌细胞中HCN4 mRNA和蛋白质的表达水平明显高于对照组细胞;感染组心肌细胞自发搏动的频率为(92.5±7.4)次/分,明显高于对照组心肌细胞的(68.9±6.2)次/分(P<0.05);动作电位出现明显的4相自动除极化,其最大舒张电位(52.8±4.2)mV明显高于对照组细胞(-62.1±2.6)mV(P<0.05);动作电位复极50%和90%的时间两者比较差异无统计学意义;在感染组细胞中,起搏电流If的电流密度为(115.7±7.8)pA/pF,也明显高于对照组细胞的(7.2±0.6)pA/pF(P<0.05).结论过度表达起搏通道基因HCN4能够明显增强乳鼠心肌细胞的自律性,从而增加心肌细胞自发搏动的频率,这提示HCN4基因有可能成为治疗缓慢性心律失常疾病的目的基因.
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