【摘 要】
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目的:探讨桦木酸对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对LncRNA MFI2-AS1的调控作用.方法:白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的桦木酸处理细胞,MFI2-AS1小分子干扰RNA(si-MFI2-AS1)及其阴性对照(si-NC)转染至软骨细胞后加入IL-1β处理细胞,MFI2-AS1过表达载体(pcDNA-MFI2-AS1)及其对照空载体(pcDNA)分别转染至软骨细胞后加入桦木酸与IL-1β共同处理细胞;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)
【机 构】
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绍兴市中心医院医共体马鞍分院骨伤科 浙江绍兴321000;绍兴市中心医院医共体马鞍分院妇产科;绍兴市中心医院医共体总院骨科
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目的:探讨桦木酸对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其对LncRNA MFI2-AS1的调控作用.方法:白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,用不同剂量的桦木酸处理细胞,MFI2-AS1小分子干扰RNA(si-MFI2-AS1)及其阴性对照(si-NC)转染至软骨细胞后加入IL-1β处理细胞,MFI2-AS1过表达载体(pcDNA-MFI2-AS1)及其对照空载体(pcDNA)分别转染至软骨细胞后加入桦木酸与IL-1β共同处理细胞;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、白细胞介素6(IL-6)的水平;CCK-8、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;qRT-PCR检测MFI2-AS1的表达量;Western blot检测活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶9(cleaved caspase-9)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)蛋白表达量.结果:桦木酸能够降低IL-1β诱导的软骨细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平(P＜0.05),可降低凋亡率和 cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、MMP-1、MMP-3蛋白水平(P＜0.05),并可增强IL-1β诱导的软骨细胞活力(P＜0.05),还可抑制IL-1β诱导的软骨细胞中MFI2-AS1的表达(P＜0.05),且呈剂量依赖性(P＜0.05);转染si-MFI2-AS1后IL-1β诱导的软骨细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平降低(P＜0.05),细胞活力升高(P＜0.05),凋亡率和 cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、MMP-1、MMP-3蛋白水平降低(P＜0.05);转染 pcDNA-MFI2-AS1 后软骨细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6的水平升高(P＜0.05),细胞活力降低(P＜0.05),凋亡率和 cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、MMP-1、MMP-3蛋白水平升高(P＜0.05).结论:桦木酸可通过抑制MFI2-AS1的表达而促进细胞增殖及抑制炎症反应、凋亡以及软骨基质胶原的破坏进而减轻骨关节炎软骨细胞损伤.
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