【摘 要】
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目的 观察Homer-1b/c对代谢性谷氨酸受体1a(mGluR1a)在神经元细胞内分布的影响.方法 采用RNA干扰技术敲除体外培养神经元Homer-1b/c基因,免疫组织化学法、免疫印迹法和逆转录
【机 构】
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陕西省人民医院神经外科,第四军医大学西京医院神经外科
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目的 观察Homer-1b/c对代谢性谷氨酸受体1a(mGluR1a)在神经元细胞内分布的影响.方法 采用RNA干扰技术敲除体外培养神经元Homer-1b/c基因,免疫组织化学法、免疫印迹法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分析基因敲除效果;免疫组织化学法观察神经元转染小干扰RNA(siRNA)后细胞内mGluR1a表达变化;激光扫描共聚焦显微镜检测神经元细胞内Ca2+含量变化.结果 Homer-1b/c siRNA转染神经元后36h,Homer-1b/c mRNA和蛋白质表达明显被抑制.RT-PCR法DNA电泳条带灰度值由对照组的57.0±3.0降至转染组的36.0±3.2,免疫印迹蛋白电泳条带灰度值由对照组的43.0±11.5升至183.0±10.3,两者差异有统计学意义(P
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