2型大麻受体的克隆及真核表达体系的构建

• 作 者: 王颖莹 陈纯海 裴莉萍 张伟 Norbert E．Kamin
• 机 构: 第三军医大学西南医院检验科,第三军医大学军事预防医学院劳动卫生学教研室,美国密西根州立大学药理与毒理系
• 出 处: 第三军医大学学报
• 发表日期: 2007年11期
• 关键词: 2型大麻受体 基因克隆 真核表达 CB2 gene cloning eukaryotic expression
• 基金项目: 第三军医大学科研基金（XG200550,XG200554）,总后115国际合作项目（05H024,06H028）

目的克隆人2型大麻受体（hCB2）基因，并构建相应的稳定表达细胞株。方法利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA，以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag—CMV-3内，以HEK293细胞构建稳定表达细胞株，以Western blot方法利用蛋白标记Flag的单克隆抗体（Anti—Flag）和CB2多克隆抗体（Anti-CB2）同时检测质粒的表达。结果酶切及测序结果表明hCB2基因克隆成功，Western blot检测结果表明Anti-Flag和Anti-CB2都能